
人誘導(dǎo)多能干細胞(hiPSCs)是疾病建模、再生醫(yī)學(xué)的核心工具,但傳統(tǒng)培養(yǎng)依賴Matrigel等動物源涂層,存在批次差異大、臨床應(yīng)用受限的問題;而人源重組蛋白篩選因傳統(tǒng)高通量篩選(HTS)試劑消耗大、成本高難以推進[1]。
小分子合成對于材料和制藥行業(yè)至關(guān)重要。然而目前在制藥研發(fā)中所采用的傳統(tǒng)方法缺乏可持續(xù)性,包括維護數(shù)百萬規(guī)模的化合物庫以及在毫米級或更大規(guī)模上對數(shù)百甚至數(shù)千種化學(xué)物質(zhì)進行優(yōu)化合成。
蛋白和蛋白以及蛋白與底物之間的相互作用,對蛋白的功能至關(guān)重要。而這些相互作用常受到一些較難發(fā)現(xiàn)的因素影響。因此,一種生物化學(xué)和生物物理學(xué)相結(jié)合的方法(其基于電驅(qū)動的DNA生物芯片和單分子質(zhì)量分析,)用于對一種轉(zhuǎn)錄因子,叉頭狀蛋白P2(FOXP2)的DNA結(jié)合和蛋白寡聚化能力從蛋白性能的不同方面進行分析鑒定。FOXP2蛋白包含核酸結(jié)合和蛋白寡聚結(jié)構(gòu)域,例如C2H2-鋅指域和一個亮氨酸拉鏈域,該結(jié)構(gòu)域的作用目前仍舊不清楚。
傳統(tǒng)非病毒轉(zhuǎn)染效率低,而篩選增強劑需測試數(shù)千種化合物,依賴微孔板的高通量技術(shù)存在試劑消耗大(每實驗需20 μL)、成本高的瓶頸。德國卡爾斯魯厄理工學(xué)院團隊開發(fā)的液滴微陣列(DMA)平臺,結(jié)合I.DOT非接觸式納升級移液系統(tǒng),首次實現(xiàn)20 nL級微量體系的高通量轉(zhuǎn)染篩選:單次篩選774種藥物,完成41796次實驗僅消耗0.84 mL細胞懸液和0.02 μmol藥物,試劑用量較384孔板減少2500倍,成功篩選出14種轉(zhuǎn)染增強劑,轉(zhuǎn)染效率提升2-5倍,為基因遞送研究和生物制藥生產(chǎn)提供突破性工具。
肝細胞在體內(nèi)執(zhí)行多種代謝和調(diào)節(jié)過程,為了了解肝臟生理和疾病發(fā)展,科學(xué)家們可以通過分離和培養(yǎng)原代肝細胞,形成模擬體內(nèi)肝臟行為的三維類器官。然而,分離原代肝細胞是非常具有挑戰(zhàn)性的工作。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)sirtuin重排配體(SirReals)是NAD+依賴型賴氨酸去乙?;窼irt2潛在的選擇性抑制劑。通過生物素化的SirReal和BLI技術(shù),我們已經(jīng)觀測到酶-抑制劑復(fù)合物存在較慢的解離率,這被推測是SirReals具備高親和性和選擇性的關(guān)鍵。
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