誘導(dǎo)多能干細胞(iPSCs)與胚胎干細胞(ESCs)在分化和增殖等許多方面具有相同的特性。在科研中,iPSCs比ESCs更具優(yōu)勢,部分原因是它們不受科學(xué)界的倫理約束。山中伸彌(Dr. Shinya Yamanaka)在2006年實現(xiàn)了基于外源因子將體細胞重編程為類似胚胎干細胞的多能狀態(tài)。山中的發(fā)現(xiàn)促成了當(dāng)前的iPSC技術(shù);此外,iPSC技術(shù)還幫助解決了基礎(chǔ)生物學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、藥物發(fā)現(xiàn)以及食品科學(xué)等領(lǐng)域研究的倫理問題。
誘導(dǎo)多能干細胞(iPSCs)與胚胎干細胞(ESCs)在分化和增殖等許多方面具有相同的特性。在科研中,iPSCs比ESCs更具優(yōu)勢,部分原因是它們不受科學(xué)界的倫理約束。山中伸彌(Dr. Shinya Yamanaka)在2006年實現(xiàn)了基于外源因子將體細胞重編程為類似胚胎干細胞的多能狀態(tài)。山中的發(fā)現(xiàn)促成了當(dāng)前的iPSC技術(shù);此外,iPSC技術(shù)還幫助解決了基礎(chǔ)生物學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、藥物發(fā)現(xiàn)以及食品科學(xué)等領(lǐng)域研究的倫理問題。
表面抗原的熒光抗體可作為驗證干細胞是否保持多能性的指標(biāo),本次實驗中我們使用了細胞表面標(biāo)記物SSEA-4(Stage-specifi c Embryonic Antigen-4)和TRA-1-60-R(Tumor-related Antigen-1-60),細胞分化后,SSEA-4和TRA-1-60-R的表達都會下調(diào)。
分選前,約6%的細胞樣本為死細胞(下圖)。
約69%的細胞對SSEA-4和TRA-1-60-R為陽性(下圖)。
使用SSEA4+TRA160+(右上角象限)門對兩種表面標(biāo)志物均陽性的細胞進行分選后,雙陽性細胞增加到93%(下圖)。
并且排除掉了大部分死細胞(下圖)。
分選后樣本培養(yǎng)24小時后顯示的單個細胞(下圖A)。培養(yǎng)5天后的iPSC細胞團(下圖B)。
綜上所述,WOLF G2能準(zhǔn)確識別和富集用SSEA-4和TRA- 1-60-R兩種表面標(biāo)記物標(biāo)記的 hiPSCs,這兩種標(biāo)記物廣泛用于標(biāo)記未分化干細胞。使用WOLF G2可以將樣本從69.6%的雙陽占比純化到92.8%,并且純化后的細胞活率高于99%。這表明WOLF G2 對神經(jīng)科學(xué)和疾病建模等干細胞相關(guān)應(yīng)用的科研工作很有幫助。WOLF G2 能溫和地分選和識別如此苛刻和脆弱的細胞類型,也證明了它的高度實用性。

